Ce que tu dois savoir faire après cette fiche
- 1.Interpréter les paramètres de l'hémogramme (NFS) et leurs valeurs de référence.
- 2.Reconnaître les principales anomalies morphologiques du frottis sanguin.
- 3.Connaître le principe et la réalisation pratique du temps de Quick et du TCA.
- 4.Décrire la technique du groupage sanguin ABO et Rhésus standard.
Sommaire de la fiche
- Introduction
- I. L'hémogramme (numération formule sanguine, NFS)
- 1. Lignée érythrocytaire
- 2. Lignée leucocytaire et plaquettaire
- II. Le frottis sanguin
- 1. Confection et coloration
- 2. Morphologie cellulaire normale (MGG)
- 3. Anomalies morphologiques du globule rouge
- III. Physiologie pratique de l'hémostase et techniques d'exploration
- 1. Rappel du déclenchement de l'hémostase lors d'une lésion vasculaire
- 2. Temps de Quick (TQ)
- 3. Temps de céphaline avec activateur (TCA)
- IV. Technique du groupage sanguin ABO et Rhésus
- Conclusion
Introduction
Ce chapitre synthétise les aspects pratiques de l'hématologie biologique : interprétation de l'hémogramme, examen du frottis sanguin, techniques de l'hémostase (temps de Quick, TCA) et du groupage sanguin (ABO, Rhésus). Il complète, par une approche méthodologique, les chapitres théoriques déjà étudiés (hématopoïèse, hémostase, immunohématologie).
I. L'hémogramme (numération formule sanguine, NFS)
Analyse quantitative et qualitative des globules rouges, globules blancs et plaquettes, réalisée par des techniques automatisées (le plus souvent) ou manuelles, sur prélèvement veineux anticoagulé à l'EDTA, de préférence à jeun.
1. Lignée érythrocytaire
| Paramètre | Définition | Valeurs usuelles (adulte) | Signification pathologique |
|---|---|---|---|
| GR | Nombre de globules rouges par unité de volume (Téra/L) | 4-4,5 (F) ; 5-5,5 (H) Téra/L | — |
| Hémoglobine (Hb) | Concentration d'hémoglobine (dosage spectrophotométrique) | 12-16 g/dL (F) ; 13-17 g/dL (H) | < normale = anémie |
| VGM | Volume globulaire moyen (courbe de Price- Jones) | 80-98 fl | < 80 = microcytaire ; > 100 = macrocytaire |
| Hématocrite (Hte) | VGM × GR / 10, en % | 37-47 % (F) ; 40-53 % (H) | > normale = polyglobulie |
| TCMH | Hb × 10 / GR, en pg | 27-32 pg | < normale = hypochromie |
| CCMH | Hb × 100 / Hte, en % | 32-36 % | < normale = hypochromie |
| RDW-CV (IDC) | Coefficient de distribution des volumes des GR | 11,5-14,5 % | > normale = anisocytose |
2. Lignée leucocytaire et plaquettaire
| Paramètre | Valeurs usuelles | Anomalies |
|---|---|---|
| Leucocytes (GB) | 4-10 Giga/L | < normale = leucopénie ; > normale = hyperleucocytose |
| PNN | 1,8-7,5 Giga/L | < 1,5 = neutropénie ; < 0,3 = agranulocytose ; > 7,5 = neutrophilie |
| Lymphocytes | 1-4 Giga/L | < 1 = lymphopénie ; > 4 = lymphocytose |
| Monocytes | 0,4-0,8 Giga/L | > 0,8 = monocytose |
| PNE | < 0,5 Giga/L | > 0,5 = hyperéosinophilie |
| PNB | < 0,2 Giga/L | > 0,2 = basophilie |
| Plaquettes | 150-400 Giga/L | < 150 = thrombopénie ; > 450 = thrombocytose |
| Réticulocytes | 20-80 Giga/L | Seuil 120 Giga/L : > 120 = anémie régénérative ; < 120 = arégénérative |
- Techniques manuelles (hématimétrie) : dosage de l'hémoglobine par le réactif de Drabkin (spectrophotométrie à 540 nm), numérations sur cellule de Malassez, hématocrite par centrifugation en tube capillaire.
II. Le frottis sanguin
1. Confection et coloration
- Réalisé à partir d'un prélèvement veineux sur EDTA ou capillaire (doigt, talon) : dépôt d'une microgoutte, étalement d'un geste continu à l'aide d'un étaleur incliné, séchage à l'air. Coloration panoptique de May-Grünwald-Giemsa (MGG) : fixation au May-Grünwald pur (3 min), dilué au 1/2 (2-3 min), coloration au Giemsa dilué au 1/10 en eau tamponnée pH 7,2 (30 min), rinçage et séchage.
- La formule leucocytaire exprime le pourcentage de chaque type cellulaire (PNN, PNE, PNB, lymphocytes, monocytes) et leur valeur absolue (% × GB), et permet de contrôler la formule automatisée ainsi que de rechercher des agrégats plaquettaires, anomalies morphologiques, cellules anormales ou parasites.
2. Morphologie cellulaire normale (MGG)
| Cellule | Caractéristiques morphologiques |
|---|---|
| Globule rouge | Disque biconcave anucléé, diamètre 7,5 µm, cytoplasme acidophile rose-gris |
| PNN | 12-14 µm, noyau segmenté (2-5 lobes), cytoplasme acidophile à granulations neutrophiles fines |
| PNE | 12-14 µm, noyau bilobé, granulations cytoplasmiques sphériques orangées |
| PNB | 10-14 µm, noyau bilobé masqué par des granulations pourpres hétérogènes |
| Petit lymphocyte | 8-10 µm, rapport N/C élevé (0,9), noyau arrondi à chromatine dense, cytoplasme réduit basophile |
| Grand lymphocyte | 12-15 µm, rapport N/C 0,6-0,8, cytoplasme plus abondant |
| Monocyte | 20-40 µm, noyau réniforme ou irrégulier, cytoplasme gris-bleuté à fines granulations rosées, parfois vacuolisé |
3. Anomalies morphologiques du globule rouge
- Anomalies de forme (poïkilocytose) : codocyte (GR en cible, cible centrale d'hémoglobine), dacryocyte (GR en larme, évocateur de myélofibrose), sphérocyte (GR sphérique sans pâleur centrale, sphérocytose héréditaire), schizocyte (fragment de GR, hémolyse mécanique/microangiopathie), elliptocyte (GR ovalaire, elliptocytose héréditaire), drépanocyte (GR falciforme, drépanocytose).
- Inclusions intra-érythrocytaires : ponctuations basophiles (agrégats d'ARN, intoxication au plomb), corps de Howell-Jolly (résidus nucléaires, asplénie), anneaux de Cabot (résidus du fuseau mitotique). Précurseurs : érythroblastes (passage sanguin anormal chez l'adulte). Parasites intra-érythrocytaires : paludisme, babésiose.
III. Physiologie pratique de l'hémostase et techniques d'exploration
1. Rappel du déclenchement de l'hémostase lors d'une lésion vasculaire
- La lésion expose le collagène et le facteur Willebrand sous-endothéliaux (déclenchant l'hémostase primaire : adhésion via GPIa/GPIb, activation plaquettaire, expression de GPIIb/IIIa, clou plaquettaire) ainsi que le facteur tissulaire des fibroblastes de l'adventice (déclenchant la voie exogène de la coagulation). L'exposition du facteur plaquettaire 3 (flip-flop membranaire) active en parallèle la voie endogène (phase contact).
2. Temps de Quick (TQ)
- Principe : temps de coagulation d'un plasma citraté recalcifié, en excès de facteur tissulaire et de phospholipides — explore la voie exogène. Test de première intention. Expression : secondes, % (taux de prothrombine, TP) ou INR (réservé au suivi des AVK). Indications : bilan préopératoire, atteinte hépatique, bilan d'hémorragie, surveillance des AVK. Prélèvement : tube citrate trisodique (9 volumes de sang pour 1 volume d'anticoagulant).
3. Temps de céphaline avec activateur (TCA)
- Principe : temps de coagulation d'un plasma pauvre en plaquettes, recalcifié, en présence de phospholipides et d'un activateur (acide ellagique) — explore la voie endogène. Expression : secondes ou ratio malade/témoin, valeur normale < 1,2. Indications : bilan préopératoire, bilan d'hémorragie, surveillance de l'héparinothérapie curative (HNF). Variations pathologiques : déficits en facteurs de la voie endogène/commune (I, II, V, VIII, IX, X, XI, XII), CIVD, anticoagulants circulants, héparinothérapie.
IV. Technique du groupage sanguin ABO et Rhésus
- Principe : mise en évidence, d'une part, des antigènes A/B par des anticorps spécifiques (épreuve de Beth-Vincent, globulaire), d'autre part, des anticorps naturels anti-A/anti-B correspondant aux antigènes absents (épreuve de Simonin, sérique). Le groupage Rhésus recherche l'antigène D par un sérum-test anti-D.
- Indications : don de sang, bilan pré-transfusionnel, bilan d'allo-immunisation fœto-maternelle. Prélèvement : ponction veineuse sur anticoagulant. Techniques : plaque d'opaline, tube à hémolyse, ou carte à gel — une même plaque permet de réaliser simultanément les épreuves globulaire et sérique ABO ainsi que l'épreuve globulaire Rh(D).
- Interprétation : nécessite le respect strict de l'ordre des réactions antigène-anticorps du tableau de résultats, avec concordance obligatoire entre les épreuves globulaire et sérique avant de conclure au groupage définitif.
Conclusion
La maîtrise des paramètres de l'hémogramme, de la lecture du frottis sanguin et des techniques d'exploration de l'hémostase et du groupage sanguin constitue le socle pratique indispensable à l'application clinique des connaissances théoriques d'hématologie cellulaire, d'hémostase et d'immunohématologie déjà étudiées. Ce chapitre clôt l'ensemble du programme d'Hématologie fondamentale traité dans ce cours.
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